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如何選用適合自己的分光光度計?

更新時間:2019-09-18點擊次數:1404
     如何選用適合自己的分光光度計?一般我們主要從光學構造、光譜范圍、帶寬、樣品類型和分析工具這五個方面來考慮。下面就按這五個方面簡單說明一下。
 
    就是光學構造。分光光度計從結構上來區分一般可分為單光束和雙光束分光光度計。何為單光束分光光度計,顧名思義,單光束分光光度計主要是依賴單束光進行測量。一束給定波長的光通過對照物,然后再通過實際樣品溶液,就能得到吸光結果。雙光束分光光度計一般是通過一個斬光輪將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品,可以實現小化光漂移并減少測量時間。但是其中一些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以分光光度計在測量一些溶液隨時間動態變化的研究中大有用處。
 
    其次就是光譜范圍。一般使用者考慮的是儀器需要比較大的靈活性,所以就得選擇更高性能的寬光譜儀器,紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導體研究需要的光譜范圍。這些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見光和甚至紅外光(780 nm 至3,000 nm)。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區域。
 
    其次則是帶寬。分光光度計的帶寬很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。調整狹縫的寬度則可以選擇投射出實驗要求的光譜。一種嚴格帶寬使得儀器能對復雜的混合物進行高分辨率的吸光測量。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿足多種實驗需要。為了測量吸光值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二極管。光電倍增管可以提供快速的反應時間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調節至特定的范圍。但一些制造商更依賴于光敏二極管的動態范圍在數秒內行使所有的光譜測量。
 
    還有就是樣品類型。在大部分的樣品類型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿足高通量的需要和大規模的實驗室需求。但盡管對于小實驗室來說,制造商仍然提供了多種容器轉換器來滿足通量的要求和減少實驗時間。用小試管裝樣品容量一般從1μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來滿足各種改變需要。體現了很強的環境適應性。
 
    后就是分析工具。大部分單機型的分光光度計包含了驅動儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器,通常與PC機一起聯用,需要從制造商提供額外的軟件。同時用戶也可以選擇升級軟件以滿足他們的需要。另外一個值得考慮的因素是數據的終使用。各獨立實驗室都有各自感興趣的實驗結果,也就有了不同的選擇。所以這也是需要考慮的一點。
 
    下面要說的就是分光光度計在使用過程中需要注意的一些問題。
 
    在分光光度計的使用過程中有這么幾點是需要注意的:
 
    1)比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題。有些使用者對這個問題不夠重視,因操作不當造成偶然誤差,嚴重影響分析結果。首先,應保證比色皿不傾斜放置。稍許傾斜,就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致,還可能使入射光不能全部通過樣品池,導致測試比準確度不符合要求。其次,應保證每次測試時,比色皿架推拉到位。若不到位,將影響到測試值的重復性或準確度。還應保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命。
 
    2)干燥劑的使用問題。干燥劑失效將導致a)數顯不穩、無法調“0”點或“100%”點(電路或光電管受潮)。b)反射鏡發霉或沾污,影響光效率、雜散光增加。鑒于上述原因,分光光度計的放置地點應遠離水池等濕度大的地方、干燥劑應定期更換或烘烤。
 
    3)儀器的工作環境。應避免陽光直射、避免強電場、避免與較大功率的電器設備共電、避開腐蝕性氣體等。
 
    4)比色皿不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗滌,也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附著的水或溶液應用擦鏡紙或細而軟的吸水紙吸干,不要擦拭,以免損傷它的光學表面。
 
    5)為了防止光電管疲勞,不測定時應將試樣室蓋打開,使光路切斷,以延長光電管的使用壽命。
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